原位雜交-GISH-武漢貝科新肽公司(多圖)
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營產(chǎn)品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH）是在20世紀80年代末在性原位雜交技術的基礎上發(fā)展起來的一種非性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法，探針首先與某種介導分子（reporter molecule）結合，雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA（或RNA）探針用特殊的核苷酸分子標記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點，不但能顯示中期分裂相，還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術和染色質纖維熒光原位雜交技術.
原位雜交技術方法大致可分為：1.雜交前準備，包括固定、取材、玻片和組織的處理，如何增強核酸探針的穿透性、減低背景染色等；2.雜交；3.雜交后處理；4.顯示（visualization）：包括性自顯影和非性標記的顯色。固定原位雜交組織化學技術在固定劑的應用和選擇上應兼顧到三個方面：保持細胞結構，限度地保持細胞內(nèi)DNA或RNA的水平；使探針易于進入細胞或組織。DNA是比較穩(wěn)定的，mRNA是相對穩(wěn)定的但易為酶合成和降解。RNA卻絕然不同，非常容易被降解。因此，對于DNA的定位來說，固定劑的種類和濃度并不十分重要。相反，在RNA的定位上，如果要使RNA的降解減少到低限度，那么，不僅固定劑的種類濃度和固定的時間十分重要，而且取材后應盡快予以冷凍或固定。
植物原位雜交除了在遺傳育種方面的應用，還在其他領域有著廣泛的應用，包括：
植物基因研究：植物基因是一種利用基因工程技術來人類遺傳疾病的方法。通過植物原位雜交技術，可以將人類基因導入到植物細胞中，并在植物細胞中表達出相應的蛋白質，為基因提供重要的物質基礎。
植物抗性研究：植物原位雜交技術可以用于研究植物對環(huán)境脅迫的抗性機制，例如抗旱、抗鹽、抗病等，有助于了解植物在環(huán)境脅迫下的生理和分子響應機制。
植物比較研究：通過植物原位雜交技術可以比較不同植物之間基因表達模式的差異，從而為植物分類和進化研究提供重要的參考依據(jù)。
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